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兔子elisa試劑盒使用時(shí)的基本操作步驟

更新時(shí)間:2024-05-06      點(diǎn)擊次數(shù):1051
  兔子ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種用于檢測(cè)和量化特定抗原或抗體在樣本中的含量的分析工具。這種類型的試劑盒利用了酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù),該技術(shù)以其高靈敏度、特異性和方便性而廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷以及食品安全等領(lǐng)域。

 

  ELISA技術(shù)基于抗原-抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)。在這種反應(yīng)中,特定的抗體被固定到微孔板上,然后加入含有待測(cè)抗原的樣本。如果樣本中含有目標(biāo)抗原,它們會(huì)與固定在板上的抗體結(jié)合。之后添加與抗原結(jié)合的酶標(biāo)記二抗,形成抗體-抗原-酶標(biāo)二抗復(fù)合物。通過(guò)添加底物進(jìn)行顯色反應(yīng),酶將底物轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物,其顏色的深淺與樣本中抗原的濃度成正比。使用分光光度計(jì)讀取結(jié)果后,可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線確定樣本中抗原的精確量。
  兔子elisa試劑盒設(shè)備組成:
  1.包被板:通常是96孔的微孔板,其內(nèi)表面被涂覆以捕獲抗體。
  2.標(biāo)準(zhǔn)品:已知濃度的抗原溶液,用于構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。
  3.樣品稀釋液:用于稀釋樣本以減少基質(zhì)效應(yīng)和非特異性結(jié)合。
  4.洗滌緩沖液:用于洗滌微孔板,以去除未結(jié)合的物質(zhì)。
  5.酶標(biāo)記二抗:針對(duì)目標(biāo)抗原的特異性抗體,與酶連接,用于信號(hào)放大。
  6.底物溶液:用于顯色反應(yīng),通常為TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)或OPD(鄰苯二酚)。
  7.終止液:用于停止底物的反應(yīng),使顏色穩(wěn)定,便于讀數(shù)。
  8.封板膜:用于覆蓋微孔板,防止液體蒸發(fā)和污染。
  9.說(shuō)明書:提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟、數(shù)據(jù)解釋和安全信息。
  使用兔子elisa試劑盒的基本步驟包括:
  1.準(zhǔn)備樣本:根據(jù)說(shuō)明書要求收集和處理樣本。
  2.加樣:向包被板的每個(gè)孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或稀釋后的樣本。
  3.孵育:將板子在適當(dāng)?shù)臏囟认路跤欢〞r(shí)間,讓抗原與抗體結(jié)合。
  4.洗滌:倒掉孔內(nèi)液體并用洗滌緩沖液清洗,以去除未結(jié)合物質(zhì)。
  5.加入二抗:加入酶標(biāo)記的二抗并再次孵育,允許其與結(jié)合的抗原反應(yīng)。
  6.再次洗滌:重復(fù)洗滌步驟以清除未結(jié)合的二抗。
  7.加入底物:加入底物溶液并在暗處孵育,使其產(chǎn)生顏色變化。
  8.加入終止液:添加終止液后,顏色變化停止,此時(shí)立即用分光光度計(jì)讀取吸光值。
  9.數(shù)據(jù)分析:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中抗原的濃度。

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