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豬白介素elisa試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理和注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2021-05-25      點(diǎn)擊次數(shù):968
  豬白介素elisa試劑盒具有穩(wěn)定的重復(fù)性,吸附性能好,空白值低,并適用于血清血漿組織勻漿等多種樣本類型的檢測(cè),方法簡(jiǎn)單,操作方便,節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
  實(shí)驗(yàn)原理
  用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
  實(shí)驗(yàn)開始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)豬白介素elisa試劑盒都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線,如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
  注意事項(xiàng)
  1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
  2. 洗滌過程很重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
  3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用加樣。
  4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,建議做復(fù)孔。
  5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后面乘以稀釋倍數(shù)。
  6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
  7. 底物請(qǐng)避光保存。
  8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

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